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強力Hieff® Robust PCR master mix——提升PCR成功率,大幅減少擴增時間

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研發背景

Hieff® Robust PCR Master Mix是一款高檢出率型PCR預混液,通過酶結構的改造、篩選及Buffer的優化,解決了常規PCR Mix檢出率低、産量低的問題。另外,延伸速度提升至15-30 s/kb,可用于基因的快速克隆。


産品描述

Hieff® Robust PCR Master Mix預混PCR反應所需的各類組分的預混液,僅需加入模闆和引物即可進行PCR擴增。因采用酶工程改造篩選的強力型Taq酶和高效擴增Buffer,該産品的擴增檢出率大大提升,可解決絕大多數PCR反應。


産品特點

○ 擴增速度達15-30 s/kb,極限速度5 s/kb

○ 擴增長度1-4 kb

○ 模闆适用性廣

○ 靶基因GC耐受範圍35-70%


産品數據

1.延伸速度30s/kb,極限延伸速度5s/kb

 

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1:以小鼠基因組為模闆,不同延伸速度(5 s/kb-60 s/kb)擴增2 kb大小的片段。PCR結束後取4 μL進行電泳檢測。aHieff® Robust PCR Mix,b-d為其他品牌普通型PCR Mix,e為快速型PCR Mix。Marker:1 kb DNA ladder。

 

2.擴增長度4kb,擴增時間更短

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2:以小鼠基因組為模闆,分别擴增1-4 kb的目的片段,PCR反應條件使用各公司推薦的PCR反應條件,PCR反應結束後,取4 μL進行電泳檢測。Marker:1 kb DNA ladder。

 

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3.适用于動植物基因組及菌落PCR實驗

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3:以人基因組DNA1)、拟南芥基因組DNA2)、水稻基因組DNA3)、小鼠基因組DNA4)、菌液(5)、質粒DNA6)為模闆,30s/kb延伸速度條件下分别擴增大小為0.5 kb、1 kb、2 kb、4 kb的片段,PCR結束後取4uL進行電泳檢測。Marker:1kb DNA ladder。


産品應用

基因快速克隆、菌落PCR、TA克隆等。


FAQ

Q:産品保質期、運輸問題

A:冰袋運輸。-20℃,保質期2年。

Q:該産品擴增的PCR産物可用于PAGE膠電泳嗎?

A:不可以。

Q:該産品可以用于擴增鼠尾、植物裂解液等粗制模闆嗎?

A:推薦10108 Hieff® HotStart PCR Genotyping Master MixWith Dye) 用于粗制模闆的擴增。

Q:出現非特異性擴增的解決方案?

A:理論上,采用該産品的建議擴增條件,可以解決大部分基因擴增。當出現非特異性擴增時,可嘗試将退火溫度梯度上升2℃解決。

Protocol

以小鼠DNA擴增1kb基因舉例說明:

體系配制

組分

體積

終濃度

ddH2O

to 50 μL

-

模闆DNA

50 ng

-

Primer正向 (10 μM)

2.5 μL

0.5 μM

Primer反向 (10 μM)

2.5 μL

0.5 μM

2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)

25 μL

 

反應程序

環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

95℃

5 min

1

變性

95℃

10 sec

30

退火

55℃

20 sec

延伸

72℃

30 sec/kb

終延伸

72

5 min

1

 

訂購信息

産品名稱

貨号

規格

購買/試用

Hieff® Robust PCR Master Mix(With dye)

10106ES03

1 mL

65.00

10106ES08

5 mL

265.00


相關産品

産品名稱

貨号

規格

價格(元)

Hieff® PCR Master Mix(With dye)

10102ES08

5 mL

150.00

Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye)

10108ES08

5 mL

345.00

Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶

10148ES60

100 U

683.00


了解翊聖


上海翊聖生物科技有限公司(Yeasen Biotech Co., Ltd.)成立于2009年,是一家緻力于分子酶原料及其相關試劑盒研發、生産的高新技術型企業。公司總部設在上海國際醫學園區,在全國(近)一線城市設有辦事處和倉儲物流,兼之健全的代理商體系,服務于全國各級科研單位、體外診斷和第三方檢測機構、生物醫藥公司等2.5萬家客戶。

 

上海翊聖生物科技有限公司的主要研發人員來自國内一線科研院所:如中科院、上海交大、武漢大學、華東師範大學、廈門大學、上海師範大學和南京農業大學等。翊聖聘請組建了頂級的技術顧問團隊,成員來自國内外一流大學,如耶魯大學,加州伯克利、中科院大學等等,擁有豐富的科研經驗以及外企工作的經曆。優秀的人才是翊聖産品的品質保證,優秀的人才是翊聖的未來。